• • کیت الایزا ساخت کشور چین برای اندازه گیری واسپین در موشها

Rat vaspin (VASPN) ELISA Kit Cusabio Biothech China

• کیت الایزا ساخت کشور چین برای اندازه گیری کمرین در موشها

Rat Retinoic acid receptor responder protein 2 (RARRES2) ELISA Kit Cusabio Biothech China

• نوارگردان مخصوص موشها ساخت کشور ایران

• ترازوی دیجیتال Beurer با دقت ۱/۰ گرم ساخت کشور چین برای اندازه گیری وزن موشها

۳-۶- ابزار جمع آوری اطلاعات پژوهش

۳-۶-۱- هورمون واسپین

هورمون واسپین، به روش آزمایشگاهی ساندویچ توسط کیت الایزا در دستگاه الایزا اندازه‌گیری میشد.

۳-۶-۲- هورمون کمرین

هورمون کمرین به روش آزمایشگاهی ساندویچ توسط کیت الایزا در دستگاه الایزا اندازه‌گیری میشد.

۳-۶-۳- وزن

وزن موشها توسط ترازوی دیجیتالی اندازه گیری میشد.

۳-۷- روش اجرا

در ابتدا ۳۵ سر موش ماده ۲ ماهه نژاد اسپراگوداولی از آزمایشگاه علوم پزشکی شیراز خریداری شد و بعد از وزنکشی همه موشها به طور تصادفی به دو گروه، یک گروه تجربی (۲۰سر) و یک گروه کنترل (۱۵سر) تقسیم شدند. پس از انتقال به محیط آزمایشگاه، جهت تطابق با محیط جدید و آشنایی با نوارگردان، آزمودنیها به مدت یک هفته با سرعتm/min 5 و با شیب صفر درجه به مدت ۱۰ دقیقه بر روی نوارگردان به تمرین پرداختند. در مدت دوره ۸ هفته تمرین نیز به صورت گروه های ۵ سر موش در قفسهای پلیکربنات شفاف و در محیطی با دمای ۲ ± ۲۳ درجه سانتیگراد، رطوبت ۵ ±۶۰ درصد و چرخه تاریکی به روشنایی ۱۲:۱۲ ساعت نگهداری شدند. حیوانات از غذا به صورت پلت مصرف کردند. ضمناً آب مورد نیاز حیوانات نیز به صورت آزاد و از طریق بطریهای ۳۰۰ سیسی ویژهی حیوانات آزمایشگاهی در دسترس آنها قرار داده شد. آزمودنیهای گروه های تمرینی با شدت بالا مطابق با برنامه تمرینی، فعالیت دویدن روی نوارگردان را به مدت ۸ هفته و ۵ جلسه در هفته اجرا کردند. این تمرین به صورت فزاینده و با رعایت اصل اضافه بار انجام شد که سرعت و زمان طبق برنامهای مشخص تنظیم گردید و هر جلسه تمرین در ساعت مشخصی از صبح انجام شد (جدول ۱). پس از اعمال متغیر مستقل (۸ هفته فعالیت هوازی شدید) دو گروه با شرایط کاملاً مشابه و در شرایط پایه (حداقل ۲۴ ساعت پس از آخرین جلسه تمرینی برای گروه تمرینی) با کتامین و زایلازین بیهوش و سپس کشته شدند. سپس ۵ سیسی خون مستقیماً از قلب استخراج شد. به مدت ۱۰ دقیقه با سرعت ۴۰۰۰ دور بر دقیقه سانتریفیوژ انجام شد و سپس پلاسما جدا گردید. پلاسمای حاصل از آن را در تیوپهای ۵/۱ سیسی و در دمای منفی ۲۰ درجه سانتیگراد نگه داشته شد و برای اندازه گیری هورمونهای واسپین و کمرین به آزمایشگاه منتقل گردید. جهت شروع آزمایش، پلاسماهای گرفته شده را در دمای محیط قرار دادند تا به دمای محیط برسد. سپس توسط کارشناس آزمایشگاهی با کیتهای ساخت کشور چین و روش آزمایشگاهی الایزا اندازه سرمی هورمونهای واسپین و کمرین را بهدست آوردند.

۳-۷-۱-پروتکل تمرینی

جدول ۳-۱- برنامه تمرینات هوازی شدید (سرعت، شیب و زمان)

روزها
کمیتها
هفته
اول
هفته
دوم
هفته
سوم
هفته چهارم
هفته
پنجم
هفته
ششم
هفته
هفتم
هفته
هشتم

شنبه
سرعت
(متر بر دقیقه)
۱۰
۱۰
۱۲
۱۳
۱۷